El rendimiento de la imagen fluorescente biológica no solo está relacionado con la luminosidad del material, sino que también está influenciado por la longitud de onda de excitación. Cuanto mayor sea la longitud de onda de excitación, más débil será la interacción entre la luz y el tejido, lo que reduce la dispersión de fotones y disminuye eficazmente la absorción del tejido y la autofluorescencia, ayudando a mejorar la relación señal-ruido, la resolución espacio-temporal y la profundidad de penetración. Por lo tanto, la imagen fluorescente excitada en la segunda ventana del infrarrojo cercano (NIR-Ⅱ) puede lograr una imagen biológica más profunda y precisa, con mayor potencial para el diagnóstico clínico y el tratamiento de enfermedades. Este artículo primero explica los principios y ventajas de la imagen fluorescente NIR-Ⅱ, luego presenta las estrategias de diseño, los avances en investigación y las aplicaciones de varios tintes fluorescentes orgánicos importantes excitados en NIR-Ⅱ, y finalmente discute las limitaciones de las sondas fluorescentes NIR-Ⅱ existentes y los desafíos de la traducción clínica, además de ofrecer perspectivas para el desarrollo futuro.

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