As enzimas ativas estão amplamente presentes em várias atividades vitais, e algumas doenças estão intimamente relacionadas à expressão anormal de enzimas ativas. A detecção precisa do nível de expressão enzimática e a imagem in situ fornecem uma base sólida para o diagnóstico e tratamento de doenças relacionadas. Até o momento, inúmeras técnicas de detecção foram desenvolvidas, entre as quais as tecnologias ópticas representadas por sondas fluorescentes moleculares apresentam vantagens como não invasividade, alta sensibilidade, baixo limite de detecção, tempo de resposta rápido e boa biocompatibilidade, sendo muito valorizadas na detecção de enzimas ativas. No entanto, ao usar sondas fluorescentes moleculares para detecção, devido à difusão fácil de pequenas moléculas no sítio ativo da enzima e à incapacidade de localização, a resolução espaço-temporal das sondas é baixa. Portanto, para melhorar a resolução espaço-temporal da detecção por imagem, reduzir a interferência de fundo e os falsos positivos, o conceito de imagem in situ foi proposto e tornou-se um dos focos de pesquisa em imagem óptica biológica. Atualmente, os pesquisadores têm relatado o design de várias sondas fluorescentes moleculares para imagem in situ de enzimas, obtendo resultados significativos. Este artigo apresenta uma introdução aprofundada às estratégias de design das sondas fluorescentes moleculares para a detecção de enzimas ativas e os avanços na pesquisa de imagem in situ, esperando fornecer alguma inspiração para os pesquisadores da área.

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